組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)活性蛋白
組織金屬蛋白酶抑制因子4（TIMP4）是基質金屬蛋白酶抑制劑（TIMPs）家族的重要成員，能夠特異性抑制基質金屬蛋白酶（MMPs）的活性，從而調控細胞外基質（ECM）的降解與重塑。TIMP4在心臟、腦、卵巢等組織中高表達，具有抑制腫瘤侵襲轉移、調節(jié)炎癥反應及維持組織穩(wěn)態(tài)等功能。研究表明，TIMP4通過抑制MMPs（如MMP-2、MMP-9）的蛋白水解活性，影響腫瘤微環(huán)境，抑制癌細胞的侵襲和血管生成。在心血管疾病中，TIMP4可減輕心肌纖維化，改善心臟功能。此外，TIMP4在神經(jīng)系統(tǒng)疾病（如阿爾茨海默?。┲锌赡芡ㄟ^減少異常ECM降解發(fā)揮保護作用。然而，TIMP4的作用具有組織特異性，在某些癌癥（如乳腺癌、前列腺癌）中可能呈現(xiàn)促腫瘤或抑腫瘤的雙重作用，具體機制仍需進一步研究。TIMP4作為MMPs的關鍵調控因子，在疾病診斷和治療中具有潛在應用價值。○ 產品貨號：APA130Mu01
通過熒光肽底物MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2的酶切實驗，我們檢測了重組小鼠TIMP4（分子量22.55kDa）對重組人MMP2（rhMMP2）活性的抑制效應。實驗體系采用50mM Tris、10mM CaCl2、150mM NaCl、0.05%Brij-35（pH7.5）的緩沖系統(tǒng)。將100μg/mL的rhMMP2經(jīng)1mM APMA于37℃活化1小時后，與系列稀釋的rmTIMP4溶液（8μL）及緩沖液（59.2μL）混合反應2小時。取50μL五倍稀釋的反應液與20μM底物等體積混合啟動反應，以320nm/405nm的激發(fā)/發(fā)射波長進行5分鐘動力學檢測。如圖1所示，重組小鼠TIMP4能顯著抑制rhMMP2的蛋白水解活性，其半數(shù)抑制濃度IC50＜0.75nM，展現(xiàn)出強效的MMP2抑制能力。該結果證實TIMP4通過直接結合MMP2發(fā)揮其生理調控功能。○ 結果展示
