近年來(lái)，我們發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子b1（TGFb1）在腫瘤領(lǐng)域中扮演著正邪難辨的雙面角色。它既是抑癌因子，抑制癌癥細(xì)胞的增殖，它同時(shí)也是促癌因子，促進(jìn)形成有利于腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移的腫瘤微環(huán)境。在下文中，我們來(lái)看看轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子b1對(duì)于機(jī)體的調(diào)節(jié)作用，對(duì)于腫瘤雙向調(diào)節(jié)機(jī)理以及對(duì)于腫瘤診斷的臨床意義和定量測(cè)定。

首先，我們認(rèn)識(shí)一下TGFb1。TGFb1屬于TGFb亞家族，除了它，家族成員還包括TGFb2,TGFb3,TGFb4等。它們是一類多功能的蛋白，在機(jī)體中行使著調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的作用。在這些成員中，TGFb1的占比最高（＞90%），活性最強(qiáng)，研究也最為深入。它不僅對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化及調(diào)亡有重要調(diào)節(jié)作用，還能調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，免疫反應(yīng)等，廣泛參與體內(nèi)各種生理、病理過(guò)程，如創(chuàng)傷愈合、血管生成、免疫性疾病及腫瘤的發(fā)生和發(fā)展等。

TGFb1調(diào)節(jié)功能的多樣性賦予了它在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中亦正亦邪的雙面性。在研究TGFb1時(shí)，我們需要先分清它究竟是善是惡。在腫瘤發(fā)生的早期階段，TGFb1主要起到抗癌作用。TGFb1對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖具有抑制作用，對(duì)于腫瘤細(xì)胞也不例外。TGFb1可發(fā)揮細(xì)胞周期阻滯作用，阻斷細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，達(dá)到抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。然而，在腫瘤的中后期，腫瘤細(xì)胞質(zhì)膜上TGFb1受體減少或缺失，從而對(duì)于TGFb1的生長(zhǎng)抑制信號(hào)產(chǎn)生耐受，腫瘤細(xì)胞的增殖不再受TGFb1抑制作用限制。但是同時(shí)，腫瘤細(xì)胞亦可大量分泌TGFb1，高表達(dá)的TGFb1可發(fā)揮免疫抑制功能，抑制T/B淋巴細(xì)胞與NK細(xì)胞活化和分化，造成機(jī)體免疫功能障礙，使得腫瘤細(xì)胞免疫逃逸；同時(shí)TGFb1能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增生和腫瘤內(nèi)血管的形成，為腫瘤的生長(zhǎng)持續(xù)提供氧和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，進(jìn)而為腫瘤的快速生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移提供合適的微環(huán)境，促進(jìn)癌癥的發(fā)展和轉(zhuǎn)化?？梢?，在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展的進(jìn)程中，TGFb1會(huì)切換角色，表現(xiàn)出兩種截然相反的作用。

基于TGFb1對(duì)于腫瘤的雙向調(diào)節(jié)作用，其表達(dá)水平與多種疾病以及惡性腫瘤的發(fā)生具有重要的關(guān)聯(lián)，可能作為一種新型有效的血液學(xué)指標(biāo)協(xié)助診斷和評(píng)估惡性腫瘤。臨床數(shù)據(jù)表明，在直腸癌、胰腺癌、子宮癌以及上皮性卵巢癌等癌癥中，外周血中TGFb1水平與腫瘤大小呈正相關(guān)，隨著癌癥分期進(jìn)展，TGFb1含量會(huì)逐漸升高。因此，TGFb1可同其它腫瘤標(biāo)志物CEA等聯(lián)合檢測(cè)，為腫瘤的臨床診斷、評(píng)價(jià)預(yù)后和復(fù)發(fā)提供參考依據(jù)。

自從德克薩斯大學(xué)MD癌癥研究中心發(fā)現(xiàn)了TGFb1對(duì)于腫瘤作用的雙面性以來(lái)，TGFb1成為了腫瘤研究的新熱點(diǎn)，其表達(dá)水平的準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)于癌癥的研究具有重要意義。如何準(zhǔn)確定量測(cè)定生物樣本中的TGFb1表達(dá)水平呢？ TFGb1不僅具有正邪兩面，還非常的調(diào)皮，喜歡玩捉迷藏的游戲。想要準(zhǔn)確的定量測(cè)定TGFb1的表達(dá)水平可不是件容易的事情。

一、樣本前處理

直接測(cè)定血清中的TGFb1，其含量非常低，但TGFb1在大多數(shù)組織和細(xì)胞中都是表達(dá)、分泌的，那為什么檢測(cè)不到呢？這一度讓科研工作者們非常疑惑。原來(lái)，多數(shù)細(xì)胞和組織分泌的TGFb1在血清或細(xì)胞外基質(zhì)以非共價(jià)鍵的形式與其前肽結(jié)合，以非活性同型二聚體的前體分子存在。TGFb1同型二聚體與延遲相關(guān)肽（Latency Associated Peptide, LAP）（轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因 子b1 N 端皆具有一個(gè)長(zhǎng) 20~30 個(gè)氨基酸序列）形成的復(fù)合稱為小潛伏復(fù)合物 （Small Latent Complex, SLC）。在細(xì)胞內(nèi)，SLC 與 TGFb1結(jié)合蛋白（Latent TGFb - Binding Protein, LTBP）結(jié)合形成了復(fù)雜的大潛在復(fù)合物（Large Latent Complex, LLC）。TGFb1以 LLC 的形式由細(xì)胞分泌到細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix, ECM）。也就是說(shuō)在血清血漿等生物樣本中，大多數(shù) TGF-b1是以 LLC 的 形式存在，要達(dá)到定量檢測(cè)生物樣本中的 TGFb1的目的，需要將樣本作前處理，釋放 TGFb1，即TGFb1 與結(jié)合蛋白解離成游離的 TGFb1蛋白。對(duì)于TGFb1的這種特性，云克隆研制了TGFb1活化劑，用于生物樣本前處理，釋放 TGFb1，即 TGFb1 與結(jié)合蛋白解離成游離的 TGFb1蛋白，達(dá)到定量檢測(cè)生物樣本中的TGFb1的目的。盡管TGFb1善于藏匿，我們也有辦法讓它無(wú)處遁形。

二、質(zhì)量可靠的定量測(cè)定試劑盒

假輿馬者，非利足也，而致千里；假舟楫者，非能水也，而絕江河。君子非生異也，善假于物也。品質(zhì)穩(wěn)定且經(jīng)過(guò)其他用戶驗(yàn)證的測(cè)定試劑能夠讓檢測(cè)事半功倍。為了協(xié)助更多的科研人員，云克隆努力了十年并將繼續(xù)堅(jiān)持下去。截止目前使用云克隆TGFb1的ELISA試劑盒已收錄約60篇高水平SCI文獻(xiàn)，影響因子累計(jì)已突破200分。

表1. TGFb1的ELISA試劑盒部分SCI文獻(xiàn)

TGFb1對(duì)于癌癥的作用研究仍然任重道遠(yuǎn)，云克隆將一路隨行，為您的科研助力！